恢复减数分裂的卵母细胞中的泛素-蛋白酶体途径

Inbal (Kirenberg) Ben-Eliezer

卵母细胞减数分裂是一个复杂的过程，包括两个连续的分裂，并涉及各种各样的控制元件。染色体的凝结和分离由CDK1调控，其活性由细胞周期蛋白B1的可用性决定，细胞周期蛋白B1在整个细胞周期中以一种循环的方式被修改。降低周期蛋白B1水平是由泛素依赖的蛋白水解机制执行的，该机制在减数分裂中具有重要作用。

这个泛素化过程包括三个连续的步骤，由多种酶E1, E2和E3促进。我们特别旨在揭示在该系统中发挥作用的泛素偶联酶(e2)。为此，GV卵母细胞被微量注射morpholino反义以干扰特定E2 mrna的翻译。微注射的卵母细胞在体外恢复减数分裂，并在显微镜下监测第一极体(PBI)的挤压。

我们发现，通过敲除UBE2C、UBE2S和UBE2D3这三种E2蛋白中的任何一种，PBI挤压受到抑制，纺锤体形成和染色体分离受到干扰。我们还发现UBE2C和UBE2S在同一途径上起作用，而UBE2D3在不同的途径上起作用。该项目的结果阐明了我们对减数分裂复杂性的认识，并可能有助于我们对不忠实染色体分离的理解。