提供的服务
- 蛋白质和多肽的ESI-MS完整质量分析
- 自动Edman降解(n端测序)
- 样品清理(微脱盐)和富集
完整蛋白质/多肽的质谱分析
完整的蛋白质或肽将在AB Sciex Q-Trap 4000质谱仪上进行分析。根据样品和所使用的质谱方法，蛋白质有多种处理方式。在完整样品上运行质谱仪后，电荷态被去卷积(重构)，结果被报告为质量。
推荐:
蛋白质/肽质量的精确分配
优点:
海量信息高度准确
缺点:
通常需要大量的样品
蛋白质必须是纯的(>90%)
样品必须处于溶液中
并不是所有的蛋白质都适用于质谱分析
高度糖基化或可变糖基化的蛋白质很难分析
氨基端测序
微测序(自动Edman降解)是一种对肽或蛋白质中的氨基酸进行测序的方法。在弱碱性条件下，苯异硫氰酸酯与不带电的n端氨基反应，形成n端氨基酸的可裂解衍生物。然后，经过连续的转化，形成更稳定的苯硫海托因(PTH)氨基酸衍生物。该PTH氨基酸衍生物可通过色谱或电泳进行鉴定。然后可以再次重复该过程以确定下一个氨基酸。这种技术的一个主要缺点是，以这种方式测序的肽不能有超过50到60个残基。
Edman降解是在岛津PPSQ 31A蛋白测序仪上完成的。蛋白质可以在溶液中提供，也可以在由电印迹衍生的PVDF膜上作为染色带提供。至少需要50 pmol蛋白质才能进行10-15个循环。为了延长循环次数，我们建议使用100 pmol的均匀蛋白。短肽测序需要100-1000 pmol。